Четверг, 2024-05-02, 20:04:03

Приветствую Вас Инкогнито | RSS

Главная страницаРегистрацияВход
[ Новые сообщения · Участники · Правила форума · Поиск · RSS ]
  • Страница 6 из 6
  • «
  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
  • 6
Модератор форума: Ischtwan, Эледем  
Форум Асcасинов » Добро пожаловать! » Обо всём » Поговорим ... о генетике
Поговорим ... о генетике
CAESARДата: Пятница, 2008-05-23, 22:46:05 | Сообщение # 101
Граф
Группа: Пользователи
Сообщений: 304
Статус: Offline
Поскольку клонирующие векторы не содержат генов vir, они сами не способны обеспечивать транспорт и интеграцию Т-ДНК в клетки растения-хозяина. Чтобы решить эту проблему разработано два подхода. В первом случае используют бинарную векторную систему. Бинарный клонирующий вектор содержит сайты инициации репликации и для E. coli и для A. tumefaciens, но не несет генов vir, т. е. это практически челночный вектор. Все стадии клонирования проводят в E. coli, а затем вектор вводят в A. tumefaciens. Штамм-рецепиент A. tumefaciens несет модифицированную неонкогенную ("разоруженную") плазмиду, она содержит полный набор vir-генов, но из нее удалена часть (или вся) Т-ДНК (так что Т-ДНК не может быть транспортирована). В этой системе на неонкогенной Ti-плазмиде синтезируются продукты vir-генов, которые мобилизуют участок Т-ДНК бинарного клонирующего вектора. Продуцируя белки, кодируемые vir-генами, неонкогенная Ti-плазмида выступает в роли помощника, способствуя встраиванию Т-ДНК из бинарного клонирующего вектора в хромосому растения.
Во втором случае используют коинтегрированную векторную систему. Векторная ДНК рекомбинирует в A. tumefaciens с "разоруженной" Ti-плазмидой, Т-ДНК которой не несет опухолеродных генов, таким образом, что весь клонирующий вектор встраивается в неонкогенную Ti-плазмиду. После рекомбинации клонирующий вектор становится частью неонкогенной Ti-плазмиды, которая содержит гены, необходимые для переноса Т-ДНК в растительную клетку.
 
CAESARДата: Пятница, 2008-05-23, 23:00:43 | Сообщение # 102
Граф
Группа: Пользователи
Сообщений: 304
Статус: Offline
Однако, системы переноса генов с помощью A. tumefaciens эффективны только в случае некоторых видов растений. В частности, однодольные растения практически не подвержены трансформации с участием этой бактерии. Тем не менее используя ряд модификаций, удалось трансформировать кукурузу и рис агробактериями A. tumefaciens.

Помимо ээто существуют различные методы переноса модифицированной ДНК в клетки растений.
1) Бомбардировка микрочастицами (биолистика) - один из наиболее многообещающих методов. Золотые или вольфрамовые сферические частицы диаметром 0,4 - 1,2 мкм покрывают ДНК, осажденной хлоридом кальция, спермидином или полиэтиленгликолем, и "выстреливают" ими в клетки из специального "ружья" пороховыми газами, сжатым воздухом или гелием. Частицы разгоняются до скорости 300 - 600 м/с и пробивают клеточную стенку и мембраны растительной клетки. При этом клетки практически не повреждаются. Попав в клетку, ДНК каким-то неизвестным пока образом интегрируется в растительную ДНК. У меня перед глазами список из 23 различных растений для которых этот метод оказался удачным.
2) Использование векторов на основе вирусов - относительно неэффективен
3) Прямое введение генов в протопласты растений - может использоваться для введения генов в протопласты только тех клеток, из которых могут быть впоследствии регенерированны жизнеспособные растения.
4) Микроинъекции - неэффективны и требуют высококвалифицированных специалистов.
5) Электропорация - см. п. 3)
6) Слияние липосом - см. п. 3)

 
CAESARДата: Пятница, 2008-05-23, 23:10:45 | Сообщение # 103
Граф
Группа: Пользователи
Сообщений: 304
Статус: Offline
Теперь по поводу маркеров.
Для идентификации трансформированных клеток необходимо уметь обнаруживать чужеродную ДНК, интегрированную в геномную ДНК растения. Более того, зачастую важно уметь количественно оценивать уровень экспрессии гена, кодирующего легко идентифицируемый продукт. Все это требует применения репортерных (маркерных) генов, позволяющих либо проводить отбор трансформированных клеток, либо оценить активность кодируемого фермента. Было протестировано несколько генов, которые можно использовать как доминантные селективные маркеры.
Выбор того или иного репортерного гена диктуется характером эксперимента. Если экспрессия гена мешает нормальному росту, то его нельзя использовать в качестве маркера. Кроме того, по мнению экспертов-биотехнологов, присутствие некоторых генов и их продуктов может приводить к загрязнению коммерческого продукта. В связи с этим лучше не вводить гены устойчивости к антибиотикам в с/х растения.
 
CAESARДата: Пятница, 2008-05-23, 23:11:02 | Сообщение # 104
Граф
Группа: Пользователи
Сообщений: 304
Статус: Offline
Вместо заключения
Обычно при введении чужеродного гена в растение одновременно вводится и селективный маркерный ген. Хотя до сих пор не было никаких указаний на то, что какой-либо из этих генов оказывает неблагоприятное воздействие на человека, животных или окружающую среду, последствия к которым в принципе может привести включение в растения селективных маркерных генов, вызвали беспокойство общественности. Например, продукты некоторых маркерных генов могут оказаться аллергенами или токсичными веществами, а гены устойчивости к антибиотикам могут попасть в патогенные почвенные микроорганизмы. Кроме того, присутствие селективных маркеров технически затрудняет трансформацию растений дополнительными генами, поскольку ни один селективный маркер не может быть использован дважды. Чтобы успокоить общественность были разработаны методы получения трансгенных растений без каких-либо маркерных генов.

Один из экспериментальных подходов к получению безмаркерных трансгенных растений включает котрансформацию растений двумя разными ДНК, одна из которых несет маркерный ген, а другая – интересующий исследователя чужеродный ген. В этом случае от 30 до 80% растений содержат оба гена, которые, однако, интегрированы в разные сайты хромосомной ДНК. После отбора трансформантов маркерный ген можно удалить из растений с помощью обычного скрещивания.

В рамках другого подхода селективный маркерный ген встраивают между растительными мобильными элементами (Ds-элементами) и такую конструкцию вводят в Т-ДНК вместе с геном транспозазы, которая вырезает участок ДНК между Ds-элементами и перемещает его в другой хромосомный сайт. В процессе встраивания Т-ДНК в ДНК растения хозяина в 90% случаев селективный маркер, находящийся между Ds-элементами, оказывается в другом сайте ДНК, при этом с вероятностью 50% этот сайт находится далеко от исходного. Таким образом селективный маркерный ген может использоваться для идентификации трансформированных растений, а затем удаляться при скрещивании.

 
VillaryДата: Суббота, 2008-05-24, 00:11:31 | Сообщение # 105
Казначей Ордена
Группа: Член Высшего Совета
Сообщений: 1774
Статус: Offline
Беее... нас на малом биофаке этим мучали, потом на биофаке запарили окончательно... и тут - опять!!!

И я подбросил монету,
Сказав себе "Зло и добро".
Монета весело встала
Три раза подряд на ребро...
 
graveДата: Суббота, 2008-05-24, 21:05:50 | Сообщение # 106
Магистр-Оружейник
Группа: Член Высшего Совета
Сообщений: 2730
Статус: Offline
т.е. если утрировать то маркерный ген, это ген который указывает "местоположение" внедренного гена? и именно он как я понял является тем камнем предкновенья из-за которого осуждают ГМ продукты?

Человек спит лицом к небу,
В одиночестве лицом к небу,
В изнеможении лицом к небу,
Победив, обращаешься к небу.

И в болезни, и во сне
Ты обращаешь людей к бесконечному небу,

Словно говоришь:
Вглядись в вечность.

Человек спит лицом к небу.
___Томихиро Хосино__(в переводе В.Зорина)__

 
CAESARДата: Суббота, 2008-05-24, 21:48:24 | Сообщение # 107
Граф
Группа: Пользователи
Сообщений: 304
Статус: Offline
Quote (grave)
т.е. если утрировать то маркерный ген, это ген который указывает "местоположение" внедренного гена? и именно он как я понял является тем камнем предкновенья из-за которого осуждают ГМ продукты?

Нет, маркерный ген - это ген, который позволяет быстро отобрать те растительные клетки, которые были подвергнуты модификации.
Например, ген устойчивости к какому-нибудь антибиотику. Тогда после обработки клеток растения можно высевать на среде, содержащий нужный антибиотик - модифицированные клетки прорастут, а немодифицированные погибнут.

А ГМО осуждают безо всяких камней преткновения, а просто из свойственной людям ксенофобии. А гены устойчивости к антибиотикам - дополнительный околонаучный аргумент.

 
graveДата: Суббота, 2008-05-24, 22:22:06 | Сообщение # 108
Магистр-Оружейник
Группа: Член Высшего Совета
Сообщений: 2730
Статус: Offline
Спасибо за разьяснение, стало немного понятней))
А про свойственную людям ксенофобию, Gallus где то в соседней темке давала ссылочку на статейку.. если интересно почитайте, я ее сейчас достану.
а вот собственно и она. если не читали почитайте)
http://elementy.ru/news/430521


Человек спит лицом к небу,
В одиночестве лицом к небу,
В изнеможении лицом к небу,
Победив, обращаешься к небу.

И в болезни, и во сне
Ты обращаешь людей к бесконечному небу,

Словно говоришь:
Вглядись в вечность.

Человек спит лицом к небу.
___Томихиро Хосино__(в переводе В.Зорина)__

 
CAESARДата: Суббота, 2008-05-24, 22:29:08 | Сообщение # 109
Граф
Группа: Пользователи
Сообщений: 304
Статус: Offline
Кстати, шарик, вылетевший из трубки, будет действительно двигаться по кривой траектории (только баллистической, загнутой вниз.) happy
 
graveДата: Суббота, 2008-05-24, 22:59:33 | Сообщение # 110
Магистр-Оружейник
Группа: Член Высшего Совета
Сообщений: 2730
Статус: Offline
Все зависит как трубку держать)

Человек спит лицом к небу,
В одиночестве лицом к небу,
В изнеможении лицом к небу,
Победив, обращаешься к небу.

И в болезни, и во сне
Ты обращаешь людей к бесконечному небу,

Словно говоришь:
Вглядись в вечность.

Человек спит лицом к небу.
___Томихиро Хосино__(в переводе В.Зорина)__

 
GallusДата: Вторник, 2008-05-27, 22:10:42 | Сообщение # 111
Шевалье
Группа: Ассасины
Сообщений: 149
Статус: Offline
Браво, CAESAR!

Попробую показать картинки.
Нуклиотиды.

Ура, что-то получилось! Качество не очень.

Прикрепления: 5671058.bmp (132.6 Kb)


Ууууууууууууу! У!
Мм-дааааа...


Сообщение отредактировал Gallus - Вторник, 2008-05-27, 22:12:03
 
GallusДата: Вторник, 2008-05-27, 22:45:42 | Сообщение # 112
Шевалье
Группа: Ассасины
Сообщений: 149
Статус: Offline
Кстати, о чём, собственно, речь.
Генно - инженерно - модифицированный организм - организм или несколько организмов, любое неклеточное, одноклеточное или многоклеточное образование, способные к воспроизводству или передаче наследственного генетического материала, отличные от природных организмов, полученные с применением методов генной инженерии и содержащие генно - инженерный материал, в том числе гены, их фрагменты или комбинации генов;

генная инженерия - совокупность методов и технологий, в том числе технологий получения рекомбинантных рибонуклеиновых и дезоксирибонуклеиновых кислот, по выделению генов из организма, осуществлению манипуляций с генами и введению их в другие организмы;

трансгенные организмы - животные, растения, микроорганизмы, вирусы, генетическая программа которых изменена с использованием методов генной инженерии.
(в ред. Федерального закона от 12.07.2000 N 96-ФЗ).


Ууууууууууууу! У!
Мм-дааааа...
 
GallusДата: Суббота, 2008-06-07, 22:39:19 | Сообщение # 113
Шевалье
Группа: Ассасины
Сообщений: 149
Статус: Offline
Статья взята из "Элементов", только не помню откуда.

Представьте себе, что в зоопарке вы подходите к большому вольеру, огражденному глубоким рвом, высоченной стеной и решетками, способными остановить танк. И с трудом различаете где-то в дальнем его углу симпатичного пушистого зверька размером с белку. Примерно такое впечатление производят нормы, принятые рядом стран (в частности, Евросоюзом) для обращения с генетически модифицированными организмами (ГМО) и продуктами из них. Прописанные в них меры безопасности мало отличаются от тех, что соблюдаются при работе с возбудителями чумы или сибирской язвы. Судя по опросам социологов, о «потенциальной опасности» ГМО слыхали практически все, но мало кто способен сформулировать, в чем именно она состоит. И неудивительно: трансгенные организмы существуют уже около 30 лет. В последние 10 лет трансгенные растения выращиваются в разных странах мира на полях, общая площадь которых в прошлом году достигла 80 млн га. Миллионы людей и бессчетное число животных ели и едят продукты из них — и за все эти годы не было получено свидетельств, что процедура генной модификации делает продукт более вредным или опасным, чем он был без нее. Напротив, согласно прошлогоднему докладу Союза германских академий наук и Гуманитарной комиссии по зеленым биотехнологиям, содержание токсичных и аллергенных веществ в продуктах из ГМ-растений оказалось ниже, чем в таких же продуктах из традиционных сортов — за счет более жесткого контроля и меньшей загрязненности паразитическими грибками.

Доводы против трансгенных организмов и продуктов в огромной степени состоят из «черного пиара», порожденного конкурентной борьбой агропромышленных корпораций, а также принципиально не проверяемых религиозно-идеологических утверждений (вроде тезиса о «вмешательстве в божественный замысел») и обычных бытовых страхов перед неизвестным. Но помимо этой информационной грязи в дискуссиях о безопасности ГМО можно разглядеть и реальные проблемы.

Самая серьезная из них — это угроза естественному биоразнообразию. Пыльца с ГМ-растений может попадать на цветы их диких предков, выпуская тем самым чужой ген в свободное плавание по дикой популяции. Если этот ген обеспечивает своим обладателям какое-нибудь жизненное преимущество (а ГМ-сорта часто отличаются от традиционных именно устойчивостью к засухе, морозу, вредителям и т. д.), то он очень быстро распространится в дикой популяции, полностью вытеснив дикую форму, — и мы, по сути дела, потеряем один из видов живых существ, восстановить который потом будет невозможно никакими мерами. То, что на месте утраченного вида будут расти его трансгенные родственники, дела не меняет: домашние лошади и коровы не могут заменить нам своих истребленных предков — тарпана и тура.

Впрочем, культурные растения часто могут скрещиваться не только со своими прямыми предками, но и с близкородственными видами, многие из которых — злостные сорняки. Если к ним попадет, скажем, ген устойчивости к гербициду (а более половины всех промышленно выращиваемых в мире ГМ-растений — это сорта, устойчивые к препарату «раундап»), получится «суперсорняк», бороться с которым будет очень сложно.

Реальный способ предотвращения этих эффектов был предложен еще в 1998 году, когда лидер трансгенных технологий в растениеводстве компания Monsanto разработала сорт ГМ-пшеницы, который помимо устойчивости к вредителям обладал также специальным геном-терминатором: содержащие его зерна по вкусовым и питательным свойствам ничем не отличались от обычных, но при высевании не прорастали. Бесплодными были и гибриды этого сорта с традиционными пшеницами, что исключало бесконтрольное распространение трансгенного наследственного материала. Компанию тут же обвинили в попытке «подсадить» фермеров на ежегодные закупки семян, и на следующий год она заявила об отказе от вывода на рынок технологии гена-терминатора. Однако биотехнологи не оставили эту многообещающую идею: в нескольких лабораториях созданы хитрые генетические механизмы, позволяющие ГМ-растениям успешно скрещиваться между собой, но делающие бесплодными семена, у которых только один из родителей был трансгенным.

Еще острее проблема предотвращения выхода сконструированных генотипов в окружающую среду стоит, если трансгенные технологии применяются к животным. Рыбоводы знают: если рыбное хозяйство использует естественный водоем, то как его ни ограждай, а рано или поздно тот вид, который в нем выращивают, будет встречаться по всей реке. Между тем сейчас из уже созданных ГМ-животных ближе всего к коммерческому использованию быстрорастущий трансгенный лосось компании Aqua Bounty. С самого начала в его геноме было изменено число хромосом. Это позволяет исключить его скрещивание с рыбами из природных популяций — но не размножение его в природных водоемах, если он в них попадет.

Пока, однако, прецедентов генетического загрязнения окружающей среды не зафиксировано — известны только случаи появления трансгенных растений на полях, засеянных обычными сортами (обычно за счет переноса пыльцы). Хотя масштабы разведения трансгенных организмов уже сейчас огромны (помимо сельского хозяйства ГМО широко применяются в фармацевтической промышленности — в развитых странах многие препараты белковой природы, в том числе такие важнейшие, как интерферон и инсулин, производятся микроорганизмами, которым вставлены соответствующие человеческие гены), и наблюдения за ними были тщательными, а порой и пристрастными (стоит заметить, что в России пока не принят закон, разрешающий выращивать ГМ-культуры, однако можно использовать импортные трансгенные культуры; для этого продукт должен пройти медико-биологическую, медико-генетическую и технологическую экспертизы. — Ред.). Не подтвердились и другие теоретические опасения, высказывавшиеся специалистами на заре «трансгенной эры». Предполагалось, например, что внедренный ген в чуждом для себя окружении может оказаться неустойчивым, склонным покидать «новую родину» и посредством вирусов распространяться по другим организмам. Вообще-то такое происходит и с «родными» генами, но ожидалось, что донорские гены будут делать это гораздо чаще. Однако прямые исследования интенсивности «горизонтального переноса» (так генетики называют обмен генетическим материалом между организмами разных видов) не выявили каких-либо отличий трансгенных сортов и штаммов от обычных.

Немало подозрений вызвало и то, что большинство трансгенных организмов несет в себе гены устойчивости к антибиотикам. Само собой напрашивалось предположение, что при поедании продуктов из таких ГМО эти гены могут быть переданы бактериям, находящимся в теле человека. Пусть даже не болезнетворным, а симбиотическим, вроде кишечной палочки, — бывает, что обычная микрофлора человеческого организма вдруг становится патогенной, и если мятежные бактерии окажутся устойчивыми к антибиотику, это сильно затруднит лечение. В начале 90-х даже появились работы, в которых сообщалось о том, что у людей, употреблявших ГМ-продукты, устойчивость патогенных микроорганизмов к антибиотикам обнаруживается чаще. Однако более тщательные исследования не подтвердили этого эффекта. Вообще до сих пор все сообщения о вреде, нанесенном людям или животным употреблением ГМ-пищи, оказывались либо выдумкой, либо неверной интерпретацией фактов. Скажем, в выступлениях против использования ГМО до сих пор встречаются ссылки на канцерогенность популярного производителя аспартама, производимого при помощи трансгенных бактерий. На самом деле аспартам первоначально производился двумя способами: биотехнологическим и чисто химическим. К настоящему времени второй способ полностью вытеснил первый, и весь производимый сегодня в мире аспартам — синтетический. Его канцерогенность от этого, естественно, никуда не делась, но она, как и следовало ожидать, связана со свойствами самого вещества. А не со способом его получения и уж тем более — не с трансгенностью производящих его бактерий.

Другое дело, когда объектом генно-инженерных манипуляций становится сам человек. В последние годы большие надежды медиков были связаны с генной терапией, позволяющей исправлять генетические дефекты в клетках человеческого тела. Такое лечение уже применялось при некоторых заболеваниях — в частности, при комбинированном врожденном иммунодефиците. Эта болезнь исключает развитие у ребенка иммунной системы, обрекая его на смерть от первой попавшейся инфекции. До появления генной терапии медицина ничем не могла помочь таким младенцам.

Однако программа генно-терапевтического лечения этой болезни была закрыта в 2002 году, когда у двух из проходивших ее 11 детей была обнаружена лейкемия. Видимо, это не было случайным совпадением. Вектор с доставляемыми генами может внедриться в любой участок генома, и у пострадавших малышей он оказался соседом гена LMO2, о котором давно известно, что его избыточная активность (которую вполне может обеспечить входящий в состав вектора мощный вирусный промотор) приводит к лейкемии. Конечно, вероятность того, что вектор внедрится именно рядом с LMO2 или другим протоонкогеном, весьма мала. Но каждому пациенту вводили примерно миллион «генетически отремонтированных» клеток, а для развития лейкемии может хватить и одного рокового попадания.

Этой истории оказалось достаточно, чтобы скомпрометировать применение в медицине вирусных векторов — но не саму идею генной терапии. Сегодня медики рассматривают возможность безвирусной доставки в клетку нужных генов. В биотехнологии такие методы давно известны: например, использование липосом (жировых пузырьков-капсул, способных проникать через клеточную мембрану) или «генной пушки» — прямого обстрела клеток микрочастицами золота с зафиксированными на их поверхности генами. Правда, эти пути свободны не только от опасностей, но и от удобств векторного переноса: вероятность встраивания переносимого таким образом гена в хромосому клетки-мишени намного меньше и при этом нет никаких гарантий, что даже в случае успешного попадания он начнет там работать. Тем не менее, по единодушному мнению медицинского сообщества, через 10-15 лет «генетический ремонт» превратится в массовую процедуру.

Конечно, никто не может сказать, что ему известны все последствия использования трансгенных технологий и что они ни при каких условиях не могут принести вреда. Но ведь любое из великих изобретений, легших в основу человеческой цивилизации, — огонь, топор, домашние животные, колесо, лодка — никогда не было абсолютно безопасным, и никто не мог предвидеть всех последствий его применения.


Ууууууууууууу! У!
Мм-дааааа...
 
ИллараДата: Пятница, 2009-09-04, 13:40:54 | Сообщение # 114
Мать Вдохновительница Ордена
Группа: Член Высшего Совета
Сообщений: 1980
Статус: Offline
Ещё к вопросу о генмодифицированных продуктах.
http://gene-on-gene.narod.ru/LikBez/Ugrosa.pdf


Я не заключаю сделок ни с Дьяволом, ни с Богом.Только с Жизнью и Смертью...
 
Форум Асcасинов » Добро пожаловать! » Обо всём » Поговорим ... о генетике
  • Страница 6 из 6
  • «
  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
  • 6
Поиск:


Copyright MyCorp © 2006